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抗体保管指南

宣布者:艾美捷科技    宣布时辰:2021-05-10     
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差别范例抗体贮存时注重要避免净化或丧失


(请每次均检查抗体申明书是不是有特别的保管请求。Abcam 公司对非准确保管的抗体不保证其有用。

对保管恰当的抗体,大大都的活性坚持时辰为数个月乃至数年。)


保管温度和前提


良多抗体的最好保管前提是分装成小包装冻存于 -20°C 或 -80°C。分装能使冻融引发的丧失减到最小,同时可避免屡次在一个管内取样而由 枪头引入的净化。分装冻存的抗体,融解一次后残剩抗体应保管于 4°C。收到抗体后,应 10,000 x g 离心 20 秒,使管口罗纹内的抗体溶液 全数离心至管底,用低卵白吸附性的微量离心管分装。分装量的几多取决于每次尝试的利用量。分装量不能少于 10μl;分装量越少,由于蒸 发和吸附于管内壁而引发的丧失会越大。


除腹水液含卵白酶应当即冻存外,大大都抗体领受后可在 4°C 保管一至两周,随后可冻存以持久保管。一样,应根据申明书保举的前提进 行保管。
免责申明和其余特别环境酶联抗体,不应冻存,4°C 可保证不变。冻畅通领悟下降酶的活性,同时影响抗体的吸附才能。


偶联标记的抗体,不管是标记的荧光染料、酶仍是生物素,都应保管于深色的管内并包裹上铝箔。若是裸露在光芒下能够会削弱偶联标记物 的活性。荧光标记物特别轻易遭到光漂白感化,全部尝试进程中均应避光。


免疫球卵白 G3 同种型抗体冻融后易构成聚合物,是以应一向保管于 4°C。


用叠氮化钠避免净化

为避免微生物净化,在抗体溶液中应插手叠氮化钠,终浓度为 0.02%(品德百分比)。良多品牌 的抗体已包罗了 0.02-0.05%的叠氮化 纳,在申明书的“保管缓冲液”局部会有描写。


甚么时辰不能用叠氮化纳

若是用抗体标记活细胞,或用于体内尝试,确保所用制剂中不含叠氮化钠。这类抗生素对大大都无机体都有毒性:会阻断细胞色


素电子通报体系的旌旗灯号。

叠氮化钠会搅扰胺基的偶联标记,应在停止标记之前将其撤除。标记后抗体可保管于叠氮化纳,也可用不含胺基的硫柳汞替换。


叠氮化钠可用透析或凝胶过滤法从抗体溶液中撤除。免疫球卵白 G 的份子量是 150,000 kDa(免疫球卵白 M 的份子量是 600,000
kDa),叠氮 化钠的份子量是 65 道尔顿。利用 14,000 kDa 的微量透析装配,跟着叠氮化钠的分散,抗体将保留。将带有烧杯的磁力搅拌器置于4°C搅拌 透析装配 6 小时,每毫升抗体溶液要用最少1升的磷酸盐缓冲液。改换 2 次磷酸盐缓冲液,每次均搅拌最少 6 小时。若是能够的话,一切资料 均请求无菌,一切溶液都应无菌配制。


冻存/苏醒的丧失

频频冻融能够使抗体变性,使其构成聚合物而下降了抗体连系才能。


大大都抗体在 -20°C 保管就充足了,不须要置于 -80°C 保管。万万不要利用无霜的冰箱。频频冻融能削减霜的构成,但这恰是应当避免的。 同理,抗体应当安排于冰箱中温度变更最小的部位,如应安排于冰箱格里,而不应安排于冰箱门上。


一些研讨者为避免频频冻融的丧失,在抗体中插手终浓度为 50% 的甘油作为抗冻剂。甘油能够将冰点下降至 -20°C 以下。良多抗体都能够 如许做,本公司供给的抗体只要一小局部测试了这类保管前提下的不变性,咱们只保证那些根据申明书保举前提贮存的抗体有活性。由于 -80°C 低于甘油的冰点,以是加了甘油的溶液不应保管于 -80°C。注重,甘油能够会被细菌净化。若是要插手甘油或其余防冻剂,应注重无菌处置。


浓缩至任务浓度的抗体最好不要在 4°C 保管跨越一地利辰。凡是卵白质在较高浓度保管时不易产生降解,抱负浓度为 1mg/ml或更高,由于 抗体溶液中包罗了如牛血洁白卵白等卵白质不变剂。插手的卵白可吸附于管壁从而使抗体的丧失减到最小。对用于聚合的抗体,不应插手蛋 白不变剂,由于其能够会与抗体协作而下降抗体的聚合活性。

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