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驱动卵白(Kinesin)活性检测试剂盒

宣布者:艾美捷科技    宣布时辰:2021-05-12     
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咱们都晓得,细胞是构成生物体的根基布局和功效单元,固然作为生物体的根基布局和功效卵白,细胞固然很小,却五脏俱全,若是把细胞比作一个大型工场,细胞核便是这个工场的CPU,会在恰当的时辰给工场中各个部分发送准确的指令,核糖体,内质网,线粒体,溶酶体等细胞器便是工场内的本能机能部分,细胞骨架构成了这座大型工场的外立面成果,和外部错综庞杂的运输通道,明天要给大师先容的配角便是咱们细胞工场传递带上的一枚通俗却不通俗的搬运工——驱动卵白(Kinesin)。


Kinesin.png

界说


驱动卵白是一类能操纵ATP水解所开释的能量驱动本身及所照顾的货色份子沿微管活动的马达卵白,与细胞内物资运输有关。驱动卵白的自动活动撑持多种细胞功效,包罗有丝割裂、减数割裂和细胞货色的运输,比方在轴突运输中。


布局及功效


驱动卵白是一条长80nm的杆状布局,头部一端有两个成球状的马达布局域,另外一端是重链((kinesin heavy chain,KHC)和轻链(kinesin light chain,KLC)构成的扇形尾端,中间是重链构成的杆状区。球状的头部具备ATP连系部位和微管连系部位。大大都驱动卵白趋势于微管的正端,在大大都细胞中,这请求将货色(比方卵白质和膜成份)从细胞中间向核心运输。这类运输体例称为顺交运输。


KHC.png


因为驱动卵白在在细胞诸多物资运输进程中起着相当首要的感化,对差别状况下驱动卵白活性检测也有了需要,驱动卵白经由过程操纵ATP水解的能量沿着微管(MT)下面挪动而起感化。一旦驱动卵白连系到它预约的MT轨道上,ATPase的感化成果凡是会进步几百到几千倍。MT激活的驱动卵白ATPase是其活动功效的首要参数,是监测和研讨各类尝试前提下驱动卵白活性的无力方式。


明天给大师带来一款艾美捷的金牌协作商Cytoskeleton公司开辟的Kinesin ELIPA?(酶联无机磷酸盐检测)试剂盒(货号:BK060)。这款试剂盒首要基于在无机磷酸盐(Pi)的存在时,在苯胺中嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)将2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤核糖核苷(MESG)催化为2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤时在330-360 nm处产生的吸光度变更来反映驱动卵白活性。一份子无机磷酸盐将在不可逆的反映中天生一份子2-氨基-6-巯基-7-甲基嘌呤。


产物用处包罗:


能源学丈量微管激活的驱动卵白ATPase的活性

驱动卵白按捺剂的挑选现

驱动卵白按捺剂IC50s的测定


试剂盒组分:


该试剂盒包罗充足的资料,可停止96次测定。包罗以下组件:

1.反映缓冲液

2.ELIPAreagent 1(MESG)

3.ELIPAreagent 1(PNP)

4.驱动卵白重链布局域(货号:KR01)

5.预制微管卵白(货号:MT002)

6.紫杉醇(货号:TXD01)

7.磷酸盐规范品

8.ELIPAreagent 1重悬缓冲液

9.ATP(货号:BSA04)

10.GTP(货号:BST06)

11.带有具体和谈的手册和详实的毛病解除指南


检测成果:

Vmax.png


微管激活驱动卵白重链ATP酶活性检测成果:检测了一些驱动卵白ATP酶活性。ATP水解的Vmax规模从驱动卵白HC的10,000 nmol ATP / min / mg到染色质激酶的470 nmol ATP / min / mg之间。


CENP-E(货号:CP01),Eg5的(货号:EG01)和Chromokinesin(货号: CR01


产物保举:


产物称号货号
Kinesin ELIPA Kit BK060


引文赏析:


1.Serena, M et al. Molecular basis of MKLP2-dependent Aurora B transport from chromatin to the anaphase central spindle. J Cell Biol6 July 2020; 219 (7): e201910059. doi:

2.Sheff, J. G. et al.Novel allosteric pathway of Eg5 regulation identified through multivariate statistical analysis of HX-MS ligand screening data. & Cell. Proteomics mcp.M116.064246 (2017) doi:10.1074/mcp.M116.064246.

3.Guido, B.C. et al.Impact of kinesin Eg5 inhibition by 3,4-dihydropyrimidin-2(1H)-one derivatives on various breast cancer cell features. BMC Cancer 15, 283 (2015).

4.Kadakkuzha, B. M. et al.High-Throughput Screening for Small Molecule Modulators of Motor Protein Kinesin. Assay Drug Dev. Technol. 12, 470–480 (2014).

5.Abnous, K., Barati, B., Mehri, S. et al.Synthesis and molecular modeling of six novel monastrol analogues: evaluation of cytotoxicity and kinesin inhibitory activity against HeLa cell line. DARU J Pharm Sci 21, 70 (2013).

6.M. Larrayoz and A. Martinez. 2012. Proadrenomedullin N-terminal 20 peptide increases kinesin's velocity both in vitroand in vivo. Endocrinology. 153, 1734-1742.

7.J. Funk et al. 2004. Development of high-throughput screens for discovery of kinesin adenosine triphosphatase modulators. Anal. Biochem. 329, 68-76.


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艾美捷科技与国际外优异的生物试剂供给商优坚持着紧密亲密的协作干系,今朝已成为浩繁国际着名品牌的中国总代办署理或一级代办署理,首要包罗:AmyJet、AAT Bioquest、Abbexa、Abnova、Agrisera、Anogen、Biosensis、Biovision、BioVendor、Caisson Labs、Cell Biolabs、Cytoskeleton、Demeditec、Duchefa、Epigentek、Equitech-Bio、EXBio、Fitzgerald、GeneCopoeia、Hycult Biotech、ImmunoReagents、ImmunoStep、Jackson、LifeSensors、LigaTrap、Lumiprobe、Mabtech、Matreya、Norgen Biotek、Origene、ProImmune、ProSpec、ScyTek、Solis BioDyne、SouthernBiotech、StressMarq、SySy、US Biological、TRC等,能够在短时辰内为用户供给专业的前沿资讯、完整的产物及物流办事。


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